Antonio Banderas studeerde aan de School of Dramatic Art in Malaga en verhuisde na het opdoen van zijn eerste toneelervaring in een plaatselijk toneelgezelschap in 1981, naar Madrid waar hij ook werk vond in de televisie-wereld. Op het vlak van toneel in elk geval een trapje hoger dan het niveau van vroeger, hij ging er aan de slag aan het Nationaal Theater van Spanje waar hij bij aangesloten bleef tot 1986.

In de jaren '80 was de acteur een vaste waarde in de films van Pedro Almodovar. Het begon allemaal met de film Labyrinth Of Passion toen Almodovar voor het eerst voor hem koos en kreeg een vervolg met Matador, Law Of Desire, Women on the Verge of a Nerveous Breakdown en Tie Me Up! Tie Me Down! Dank zij het grote succes van deze twee films die een groot internationaal publiek bereikten, zette Banderas in 1992 dan de stap naar Amerikaanse films door de (hoofd)rol te vertolken van een jonge Cubaanse muzikant in Mambo Kings, aan de zijde van Armand Assante. Voor hem niet echt een makkie want de acteur sprak toen nog geen woord Engels en moest het als het ware over de fonetische boeg gooien.

De grote doorbraak (in Amerika) voor Antonio Banderas kwam er door zijn rol van Che Guevara in de musical Evita die Alan Parker in 1996 uitbracht. Banderas werd hiervoor genomineerd voor een Golden Globe voor beste acteur. Voor zijn rol in The Mask Of Zorro met Catherine Zeta-Jones en Anthony Hopkins kreeg hij een tweede Golden Globe nominatie.
Antonio Banderas heeft tot hiertoe al meer gedaan dan enkel acteren. Zo maakte hij in 1999 zijn regiedebuut met Crazy in Alabama, een film met Melanie Griffith nota bene. Wat regisseren betreft bleef het hier overigens niet bij. Later stond hij ook nog achter de camera voor de Spaanse film El Camino de Los Ingleses. Met het stuk Nine, gebaseerd op 8 1/2 van Federico Fellini, maakte hij zijn debuut op Broadway, met succes want hij werd genomineerd voor een Tony Award als beste acteur in een musical en won ook nog een aantal andere prijzen hiervoor (Drama Desk Award, Outer Critics Circle Award, Drama League Award en Theatre World Award).

Andere films met Antonio Banderas zijn ondermeer Femme Fatale van Brian De Palma, Frida, vreemd genoeg de Spy kids trilogie, Desperado van Robert Rodriguez (jaren later gevolgd door Once upon a time in Mexico), Original Sin, Ballistic Ecks vs. Sever en And starring Pancho Villa As Himself, een film waar hij zijn derde Golden Globe nominatie voor kreeg.  In 2006 was de Spaanse acteur nog te zien in de dansfilm Take The Lead.
Verder heeft hij ook al verschillende keren zijn stem ontleend aan een personage in een animatiefilm. Bijvoorbeeld voor (de stem van) de Gelaarsde Kat (in Shrek 2) maar je kon hem ook horen in de derde Shrek film, Shrek The Third en natuurlijk ook in Puss in Boots.

Antonio Banderas was vroeger gehuwd met ene Ana Leza en vond hierna in Melanie Griffith een andere partner.